Xét nghiệm bệnh Lyme - chúng trông như thế nào và chi phí xét nghiệm bệnh Lyme là bao nhiêu

Các xét nghiệm bệnh Lyme nên được thực hiện mỗi khi bị bọ chét cắn. Bạn phải đợi đến vài tuần để bắt đầu chẩn đoán. Trước đó, bạn có thể kiểm tra ve đã cắn chúng ta xem nó có phải là vật mang mầm bệnh hay không. Xét nghiệm bệnh Lyme như thế nào và giá xét nghiệm là bao nhiêu?

Việc xét nghiệm bệnh Lyme (bệnh do vi khuẩn do ve gây ra bởi Borrelia burgdorferi và các giống của nó) được khuyến cáo nên thực hiện càng sớm càng tốt sau khi bị ve cắn.

Trong chẩn đoán bệnh Lyme, các sơ đồ chẩn đoán cụ thể được sử dụng, chủ yếu dựa trên các phương pháp huyết thanh học.

Tuy nhiên, có tính đến cơ chế bệnh sinh phức tạp của bệnh và những hạn chế của các phương pháp xét nghiệm, bệnh Lyme có thể gây ra nhiều khó khăn trong chẩn đoán.

Do đó, ngày càng có nhiều thử nghiệm trong phòng thí nghiệm trên thị trường có thể giải quyết vấn đề này. Thật không may, hầu hết chúng không có giá trị chẩn đoán xác nhận và không nên được sử dụng trong chẩn đoán thường quy bệnh Lyme.

Mục lục:

1. Borreliosis sớm tại địa phương - xét nghiệm trong phòng thí nghiệm
2. Bệnh Lyme phổ biến sớm - một xét nghiệm cho bệnh Lyme
3. Bệnh Lyme muộn - những xét nghiệm nào để phát hiện bệnh Lyme?
4. Lyme borreliosis - theo dõi điều trị
5. Bệnh Lyme - phức hợp miễn dịch lưu hành
6. Bệnh Lyme - xét nghiệm chuyển đổi tế bào lympho (LTT)
7. Bệnh Lyme - xét nghiệm CD57
8. Berlioz - Thử nghiệm ELFA và CLIA
9. Bệnh Lyme - kiểm tra một con ve bị loại bỏ khỏi da

Borreliosis sớm tại địa phương - xét nghiệm trong phòng thí nghiệm

Ở giai đoạn này, sau khi tiếp xúc với một con ve bị nhiễm trùng, nhiễm trùng cục bộ xảy ra và cái gọi là ban đỏ di cư (tiếng Latin erythema migrans), là một triệu chứng đặc trưng của bệnh Lyme.

Sự hiện diện của ban đỏ tại vị trí bị ve cắn là đủ để xác định nhiễm trùng Borrelia. Giai đoạn đầu của bệnh Lyme cục bộ mất vài ngày đến khoảng 4 tuần, và bệnh nhân có thể xuất hiện các triệu chứng giống như cúm.

Đây là giai đoạn nhiễm trùng sớm nhất trong đó các phương pháp huyết thanh học (ELISA và Western blot), xét nghiệm sự hiện diện của các kháng thể IgM và IgG, có thể cho kết quả âm tính giả. Ở giai đoạn này, cái gọi là cửa sổ huyết thanh, là thời kỳ đầu của nhiễm trùng khi cơ thể chưa sản xuất kháng thể chống lại Borrelia.

Các kháng thể IgM đầu tiên xuất hiện vào khoảng tuần thứ 2 của bệnh, nhưng ở hầu hết mọi người, sự hiện diện của chúng không được phát hiện cho đến một vài tuần. Trong trường hợp kết quả huyết thanh âm tính, xét nghiệm nên được lặp lại khoảng 3-4 tuần sau khi nhiễm bệnh.

ELISA và Western blots được hoàn trả bởi Quỹ Y tế Quốc gia, nhưng bác sĩ giới thiệu phải có căn cứ để chỉ định chúng. Nói riêng, xét nghiệm ELISA có giá từ 30 đến 100 PLN và Western blot từ 80 đến 200 PLN.

Kiểm tra phân tử bằng PCR có thể được xem xét ở giai đoạn nhiễm trùng rất sớm. Phương pháp này phát hiện vật liệu di truyền của vi khuẩn (DNA), có nhiều nhất trong dịch cơ thể ở giai đoạn đầu của nhiễm trùng. Thời gian từ khi lây nhiễm càng lâu, khả năng phát hiện DNA của vi khuẩn càng ít.

Tuy nhiên, cần lưu ý rằng ở Ba Lan vẫn chưa có tiêu chuẩn hóa các phương pháp phân tử trong chẩn đoán bệnh Lyme và do đó phương pháp này không được khuyến khích làm công cụ chẩn đoán. Xét nghiệm phân tử không được Quỹ Y tế Quốc gia hoàn trả và chi phí trong khoảng từ 160-200 PLN.

Đáng biết

Các giai đoạn của nhiễm trùng Borrelia burgdorferi:

• Borreliosis sớm tại chỗ
• bệnh Lyme phổ biến sớm
• bệnh muộn

Cũng đọc: Ban đỏ di chuyển sau khi bị bọ ve cắn. Làm thế nào để nhận ra nó? Thuốc chủng ngừa bệnh viêm não do ve

Bệnh Lyme phổ biến sớm - một xét nghiệm cho bệnh Lyme

Ở giai đoạn bệnh Lyme phổ biến sớm, nhiều cơ quan, khớp, cơ, hệ thần kinh và hệ tim mạch bị nhiễm trùng. Bệnh Lyme giai đoạn đầu phát triển với đau đầu, viêm dây thần kinh mặt, mệt mỏi hoặc cứng cổ. Giai đoạn này kéo dài trong khoảng vài tuần sau khi nhiễm trùng.

Ở giai đoạn bệnh Lyme phổ biến sớm, chủ yếu có kháng thể IgM. Vào 6 - 8 tuần sau khi nhiễm, các kháng thể IgG cũng bắt đầu xuất hiện. Do đó, các phương pháp huyết thanh học là cơ sở chẩn đoán ở giai đoạn nhiễm trùng này.

Chẩn đoán huyết thanh học đối với bệnh Lyme bắt đầu với giai đoạn sàng lọc, tức là thực hiện xét nghiệm ELISA nhạy cảm.

Nếu kết quả là âm tính có nghĩa là chưa phát hiện xoắn khuẩn Borrelia hoặc kết quả là âm tính giả. Khi kết quả là dương tính hoặc dương tính yếu, xét nghiệm Western blot khẳng định, có độ đặc hiệu cao, nên được thực hiện để xác nhận kết quả của phương pháp ELISA.

Nếu nghi ngờ u tế bào thần kinh, xét nghiệm PCR phân tử từ dịch não tủy có thể được thực hiện. Phương pháp PCR rất nhạy và do số lượng xoắn khuẩn Borrelia trong dịch não tủy ít, nên nó có thể hữu ích trong việc chẩn đoán.

Tuy nhiên, nếu không có xét nghiệm huyết thanh học trước, nó không phải là chẩn đoán nhiễm trùng.

Bệnh Lyme muộn - những xét nghiệm nào để phát hiện bệnh Lyme?

Giai đoạn cuối của nhiễm trùng là bệnh Lyme muộn, trong đó vi khuẩn lan rộng hơn đến các cơ quan và hình thành ngày càng nhiều biến chứng nghiêm trọng của nhiễm trùng. Xuất hiện bệnh Lyme muộn, bệnh Lyme khớp, hoặc viêm da teo. Bệnh Lyme muộn có thể kéo dài đến vài năm.

Chỉ có các kháng thể IgG được phát hiện bằng phương pháp huyết thanh học ở giai đoạn nhiễm trùng này. Mức độ cao của IgG chống lại xoắn khuẩn Borrelia và sự hiện diện của các triệu chứng cho thấy bệnh Lyme. Tuy nhiên, trong một số trường hợp (đặc biệt là ở những người được điều trị kháng sinh rất nhanh trong giai đoạn đầu của nhiễm trùng), kháng thể IgM có thể tồn tại trong vài năm. Trong những tình huống như vậy, những kháng thể này không phải là dấu hiệu của nhiễm trùng đang hoạt động.

Bệnh Lyme là gì?

Lyme borreliosis - theo dõi điều trị

Một trong những khó khăn lớn nhất trong việc chẩn đoán bệnh Lyme là thiếu các dấu hiệu xét nghiệm nhạy và đặc hiệu có thể đánh giá hiệu quả của liệu pháp kháng sinh. Theo mặc định, việc quan sát các triệu chứng bệnh được sử dụng để đánh giá hiệu quả của nó.

Nghiên cứu chỉ ra rằng việc xác định nồng độ kháng thể IgM và IgG chống lại kháng nguyên VLsE / C6 của xoắn khuẩn có thể được sử dụng để theo dõi hiệu quả của nhiễm trùng Borrelia.

Protein VlsE / C6 xoắn ốc gây ra phản ứng rất mạnh và nhanh của hệ thống miễn dịch. Việc bổ sung kháng nguyên này vào bộ các xét nghiệm huyết thanh học làm tăng đáng kể độ nhạy của xét nghiệm. Sự hiện diện của các kháng thể IgG chống lại protein VLsE / C6 ở bệnh nhân mắc bệnh Lyme là:

• 20-50% ở bệnh nhân ở giai đoạn đầu của nhiễm trùng
  
  
• 70-90% ở bệnh nhân mắc bệnh Lyme phổ biến sớm
  
  
• gần như 100% ở những bệnh nhân mắc bệnh sinh muộn

Việc khám bệnh không được Quỹ Y tế Quốc gia hoàn trả và có chi phí từ 80-150 PLN.

Bệnh Lyme - phức hợp miễn dịch lưu hành

Các xét nghiệm huyết thanh học là cơ sở để chẩn đoán bệnh Lyme. Tuy nhiên, có những tình huống lâm sàng có thể khiến các xét nghiệm này âm tính giả. Một trong số đó là sự hiện diện của cái gọi là phức hợp miễn dịch bao gồm kháng nguyên xoắn khuẩn Borrelia và kháng thể IgM hoặc IgG đặc hiệu.

Các phức hợp miễn dịch ngăn chặn các kháng thể, khiến chúng không thể phát hiện bằng các phương pháp huyết thanh học và do đó có thể gây ra kết quả âm tính giả. Vấn đề này xảy ra chủ yếu với nhiễm trùng rất nặng.

Nếu một bệnh nhân có các triệu chứng rõ ràng của bệnh Lyme và kết quả xét nghiệm là âm tính, một số phòng thí nghiệm cung cấp một xét nghiệm liên quan đến sự phân hủy hóa học của các phức hợp miễn dịch. Điều trị này nhằm mục đích giải phóng các kháng thể và chỉ sau đó đo nồng độ của chúng.

Nghiên cứu chỉ ra rằng việc sử dụng quy trình như vậy trước khi xét nghiệm huyết thanh học có thể làm tăng đáng kể việc phát hiện các kháng thể đối với kháng nguyên Borrelia. Tuy nhiên, phương pháp này không được sử dụng thường xuyên do thiếu tiêu chuẩn trong các phòng thí nghiệm.

Giá của xét nghiệm dao động từ PLN 110-210 (đối với kháng thể IgM hoặc IgG) và không được Quỹ Y tế Quốc gia hoàn trả.

Bệnh Lyme - xét nghiệm chuyển đổi tế bào lympho (LTT)

Xét nghiệm Chuyển đổi Tế bào Lympho (LTT) được sử dụng trong các lĩnh vực y học khác nhau, bao gồm trong cấy ghép, dị ứng học và gián tiếp trong chẩn đoán xoắn khuẩn Borrelia. Trong chẩn đoán bệnh Lyme, xét nghiệm xác định sự hiện diện của các tế bào miễn dịch trong máu của bệnh nhân (tế bào lympho T) đã tiếp xúc với vi khuẩn. Xét nghiệm sử dụng kỹ thuật ELISPOT, nguyên tắc của nó tương tự như phương pháp ELISA, nhưng nhạy hơn nó.

Một số đề xuất rằng nên thực hiện xét nghiệm LTT để tìm xoắn khuẩn Borrelia để:

• xác nhận nhiễm trùng đang hoạt động ở những người có kết quả xét nghiệm huyết thanh dương tính, nhưng không có triệu chứng rõ ràng cho thấy bệnh
  
  
• xác nhận nhiễm trùng đang hoạt động ở những người có xét nghiệm huyết thanh âm tính hoặc ranh giới, nhưng có các triệu chứng lâm sàng của bệnh
  
  
• theo dõi nhiễm trùng sau khi điều trị kháng sinh
  
  
• đánh giá sự tái phát của Lyme borreliosis

Theo khuyến nghị của Nhóm công tác được công bố vào năm 2014, cả xét nghiệm LTT và xác định mức độ kháng thể trong các phức hợp miễn dịch lưu hành đều không được khuyến cáo trong chẩn đoán bệnh Lyme.

Các phương pháp này vẫn phải trải qua quá trình xác nhận (tức là xác nhận độ tin cậy của chúng) để trở thành một công cụ chẩn đoán hữu ích.

Giá của xét nghiệm dao động trong khoảng 400-550 PLN và nó không được Quỹ Y tế Quốc gia hoàn trả.

Bệnh Lyme - xét nghiệm CD57

Chất đánh dấu bề mặt CD57 là một loại protein xuất hiện trên bề mặt của tế bào miễn dịch - tế bào NK (Natural Killers).

Các bác sĩ từ nhóm ILADS, tức Hiệp hội Quốc tế về Bệnh Lyme và các Bệnh liên quan, tin rằng trong giai đoạn mãn tính của bệnh Lyme, hệ thống miễn dịch bị ức chế, điều này được phản ánh trong việc giảm dân số tế bào NK có dấu hiệu CD57.

Họ cho rằng việc đo số lượng của chúng trong máu có thể được sử dụng để đánh giá hoạt động của bệnh. Tuy nhiên, cũng như phương pháp LTT và sự phá vỡ các phức hợp miễn dịch, phương pháp này vẫn cần được xác nhận. Giá của xét nghiệm dao động trong khoảng 170 PLN và nó không được Quỹ Y tế Quốc gia hoàn trả.

Bạn có thể tìm thêm về bài kiểm tra CD57 tại đây.

Berlioz - Thử nghiệm ELFA và CLIA

Trong chẩn đoán bệnh Lyme, phương pháp ELISA (Thử nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme) chủ yếu được sử dụng. Tuy nhiên, nhiều phòng thí nghiệm cũng sử dụng các phương pháp huyết thanh học khác như ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay) được thực hiện với Vidas® và CLIA (Chemiluminescent Immunoassay) được thực hiện với Liaison® analyzer.

Họ khác nhau như thế nào? Nguyên lý hoạt động của 3 phương pháp rất giống nhau đều sử dụng kháng thể đặc hiệu và khả năng liên kết với kháng nguyên. Các phương pháp ELFA và CLIA cho phép tự động hóa các phân tích và thực hiện nhanh hơn các thử nghiệm trong phòng thí nghiệm. Các phương pháp này cũng có thể phát hiện nồng độ kháng thể thấp hơn trong vật liệu sinh học được thử nghiệm.

Về độ tin cậy của kết quả thu được với ba phương pháp, chúng gần như giống nhau. Các kết quả dương tính yếu hoặc dương tính thu được bằng phương pháp ELFA và CLIA, đối với phương pháp ELISA, cần được xác nhận bằng phân tích Western blot.

Đáng biết

Bệnh Lyme - kiểm tra một con ve bị loại bỏ khỏi da

Một số phòng thí nghiệm cung cấp xét nghiệm một con ve được lấy ra khỏi da để tìm sự hiện diện của DNA Borrelia. Theo khuyến nghị của Nhóm công tác được công bố vào năm 2014, một nghiên cứu như vậy hoàn toàn không phải là một phương pháp chẩn đoán bệnh Lyme.

Mặc dù nguy cơ truyền vi khuẩn từ bọ ve sang người tỷ lệ thuận với thời gian hút máu, nhưng sự hiện diện của DNA xoắn khuẩn trong bọ ve không đồng nghĩa với việc lây nhiễm, và sự vắng mặt của nó không loại trừ khả năng lây nhiễm.

Những người ủng hộ phương pháp này tin rằng nó hữu ích trong việc đưa ra quyết định về việc áp dụng liệu pháp kháng sinh ở những người có các triệu chứng biểu hiện của bệnh Lyme, nhưng không có sự xuất hiện của ban đỏ di cư. Giá của những người trả lời như vậy dao động trong khoảng 100-500 PLN và nó không được Quỹ Y tế Quốc gia hoàn trả.

Văn chương

1. Phòng thí nghiệm chẩn đoán các bệnh do ve gây ra Khuyến nghị của Nhóm công tác: Phòng Chẩn đoán Phòng thí nghiệm Quốc gia, Viện Y tế Công cộng-Viện Vệ sinh Quốc gia, Chuyên gia tư vấn quốc gia trong lĩnh vực bệnh truyền nhiễm, Khoa Truyền nhiễm và Nhiễm trùng thần kinh, Đại học Y Białystok, Hiệp hội Vi rút học Ba Lan, Warsaw 2014.
2. Rychlik U. và các cộng sự. Chẩn đoán trong phòng thí nghiệm thử nghiệm chuyển đổi tế bào bạch huyết (LTT). Tạp chí Chẩn đoán Xét nghiệm 2013, 49 (4); 425-428.
3. Marques A. R. Chẩn đoán trong phòng thí nghiệm bệnh Lyme - Những tiến bộ và thách thức. Nhiễm Dis Clin Bắc Am. Năm 2015; 29 (2): 295–307.
4. Marques A. và cộng sự. Số lượng tế bào giết tự nhiên không khác nhau giữa những bệnh nhân mắc hội chứng hậu Lyme và nhóm chứng. Thuốc chủng ngừa Clin Immunol. 2009, 16: 1249-1250.
5. Krzemień P. J. Tầm quan trọng của kháng nguyên Vlse / C6 như một chất chỉ điểm trong chẩn đoán bệnh Lyme sớm và nghiên cứu hiệu quả điều trị của nó. Các vấn đề về sức khỏe của nền văn minh 2017; 11 (2): 87-92.
6. Miąskiewicz K. và các cộng sự. Đề xuất phương pháp luận mới và giải thích kết quả của kháng thể chống lại Borrelia burgdorferi - phân tích thành phần kháng thể của các phức hợp miễn dịch lưu hành. Bệnh thấp khớp 2011; 49, 5: 328–334.
7. Muraczyńska B. và Gałęziowska E. Những tranh cãi liên quan đến chẩn đoán và điều trị bệnh Lyme trên thế giới. Y học đại cương và Khoa học sức khỏe, 2015; 21 (4): 372–377.

Giới thiệu về tác giả

Karolina Karabin, MD, PhD, nhà sinh học phân tử, nhà chẩn đoán phòng thí nghiệm, Cambridge Diagnostics Polska Một nhà sinh vật học có chuyên môn về vi sinh và một nhà chẩn đoán phòng thí nghiệm với hơn 10 năm kinh nghiệm trong phòng thí nghiệm. Tốt nghiệp Trường Y học Phân tử và là thành viên của Hiệp hội Di truyền Người Ba Lan. Trưởng nhóm nghiên cứu được cấp bằng tại Phòng thí nghiệm Chẩn đoán Phân tử thuộc Khoa Huyết học, Ung thư và Bệnh nội của Đại học Y Warsaw. Bà đã bảo vệ danh hiệu tiến sĩ khoa học y tế ngành sinh học y học tại Khoa Y 1 của Đại học Y Warszawa. Tác giả của nhiều công trình khoa học đại chúng và khoa học trong lĩnh vực chẩn đoán trong phòng thí nghiệm, sinh học phân tử và dinh dưỡng. Hàng ngày, với tư cách là chuyên gia trong lĩnh vực chẩn đoán trong phòng thí nghiệm, ông điều hành bộ phận chuyên sâu tại Cambridge Diagnostics Polska và hợp tác với một nhóm chuyên gia dinh dưỡng tại CD Dietary Clinic. Anh ấy chia sẻ kiến ​​thức thực tế của mình về chẩn đoán và điều trị bệnh bằng chế độ ăn uống với các bác sĩ chuyên khoa tại các hội nghị, khóa đào tạo và trên các tạp chí và trang web. Cô đặc biệt quan tâm đến ảnh hưởng của lối sống hiện đại đến các quá trình phân tử trong cơ thể.